В Японии разработан один из самых простых на сегодняшний день серологических тестов для диагностики СПИДа. Метод основан на агглютинации частиц латекса с адсорбированными на них антигенами ВИЧ под действием специфических антител исследуемой сыворотки.
По чувствительности предлагаемый метод не уступает иммуноферментному анализу (при использовании наборов фирмы Abbott), а по специфичности превосходит его. Иммунологическая диагностика — это наиболее доступный и простой метод распознавания СПИДа. Однако бывают ситуации, когда самые чувствительные методы выявления антител не позволяют правильно поставить диагноз. Это касается, прежде всего, случаев недавнего инфицирования, когда в крови еще не успело накопиться достаточно высокое количество антител к ВИЧ. Кроме того, небольшая часть лиц остается сероотрицательной и при» явных признаках заболевания. В этих случаях лабораторная диагностика СПИДа должна быть направлена на выделение самого вируса, выявление вирусных антигенов, а также лимфоцитов, инфицированных BH4S.
Материалом для выделения ВИЧ служат периферические Т-клетки, лейкоциты костного мозга, лимфоузлов, ткани мозга, слюна, сперма, спинномозговая жидкость. В лаборатории R. Gallo в течение 2 лет, используя преимущественно культуру лимфоцитов Н9, удалось изолировать от больных СПИДом и от лиц со СПИД-ассоциированным симптомокомплексом свыше 100 штаммов ВИЧ. Значительно облегчалось выделение вируса при включении гидрокортизона в состав культуральной среды.
Группа японских исследователей провела сравнительное исследование чувствительности разных ОКТ4, положительных клеточных линий человеческого происхождения в отношении ВИЧ. Наиболее чувствительными оказались клетки МТ-2 и МТ-4, полученные из лимфоцитов пупочной вены при трансформации вирусом HTLV-I. В этих культурах клеток за короткое время развивается выраженный цито-деструктивный процесс, позволяющий ставить вопрос о возможности титрования ВИЧ методом бляшек.
Выявление ВИЧ в культуре клеток проводят по цито-патическому действию, на основании образования симпластов, а также методами иммунофлуоресценции, электронной микроскопии или же по активности обратной транскриптазы.
Современные методы индикации клеток, пораженных вирусом, позволяют выявить один инфицированный Т4-лимфоцит на 1000 клеток. Одним из наиболее точных методов, используемых с этой целью, является лазерная проточная цитометрия. Метод лишен недостатков, свойственных иммунологическим тестам. В сочетании с компьютерными устройствами, лазерами, интерферометрией проточная цитометрия позволяет не только выявлять инфицированные клетки, но и изучать свойства популяций пораженных лимфоцитов.
Комментарии